1.D-Hanks液高壓滅菌之后,晾室溫,4℃保存?zhèn)溆谩?/div>
2.稱取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中(夏天時研磨器應放在冰浴中),加入少量D-Hanks液研磨1 000次左右,調(diào)制成糊狀。再放入4℃預冷的適量D-Hanks液中,4℃下磁力攪拌使*溶解。
3.用NaHCO3干粉將胰酶溶液的pH值調(diào)8.0左右(胰酶作用的適pH值),并加入0.02%EDTA以協(xié)助消化作用。
4.濾過除菌,-20℃凍存。
1.BSS的pH值應確定為7.2左右。
2.如配制的Hanks液高壓滅菌后液體變混,則可將100 mL的CaCl2與含有其他成分的液體分別裝瓶高壓滅菌之后,再在無菌條件下配制,定容。這樣可以避免高壓滅菌后液體變混。
3.胰酶受熱易失活,所以盡量避免盛夏配制,并且在配制過程中溫度應始終保持在4℃左右。
4.胰酶研磨要充分,否則在過濾時會將較大的顆粒過濾掉,不能達到真正的濃度。
5.胰酶分裝時盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因為冷凍保存時體積會膨脹,而多次使用同一瓶胰酶反復凍融會降低消化效果并可能造成污染。