土壤淀粉酶的分離芽孢桿菌實驗
淀粉酶(amylase,AMY或AMS)全稱是1,4-α-D-葡聚糖水解酶,催化淀粉及糖原水解,生成葡萄糖、麥芽糖及含有α1,6-糖苷鍵支鏈的糊精。一般作用于可溶性淀粉、直鏈淀粉、糖元等α-1,4-葡聚糖,水解α-1,4-糖苷鍵的酶。淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶類總稱,通常通過淀粉酶催化水解織物上的淀粉漿料,由于淀粉酶的性及專一性,酶退漿的退漿率高,退漿快,污染少,產品比酸法、堿法更柔軟,且不損傷纖維。淀粉酶的種類很多,根據織物不同,設備組合不同,工藝流程也不同,目前所用的退漿方法有浸漬法、堆置法、卷染法、連續(xù)洗等,由于淀粉酶退漿機械作用小,水的用量少,可以在低溫條件下達到退漿效果,具有鮮明的環(huán)保特色。
該實驗是:取樣以后分散在無菌水中,在一百度左右加熱十分鐘殺菌,由于芽孢桿菌產芽孢,不會死,其他的細菌死亡,將樣品梯度稀釋,
配制組合培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中不含有葡萄糖等單糖碳源,只含有大分子的淀粉,再加上一些無機鹽,并且加入醋酸t(yī)(thallium acetate)磺胺脒,等抑制革蘭氏陰性菌生長的試劑,滅菌,倒平板。(培養(yǎng)基的成分要適合芽孢桿菌的生長,起富集作用)
然后用梯度稀釋后的樣品涂布,選擇有單菌落生長的培養(yǎng)基,在顯微鏡下鏡檢,如果符合芽孢桿菌的形態(tài)標準,則認為已經分離到了,挑取單菌落,保留菌種。