膽堿酯酶(Cholinesterase,ChE)是一類催化?;憠A水解的酶類,又稱?;憠A水解酶。根據(jù)底物特異性和抑制劑敏感性不同,可將其分為兩類,一類是乙酰膽堿酯酶(AchE,EC 3.1.1.7,又稱真性膽堿酯酶,特異性膽堿酯酶),負責水解乙酰膽堿酯;另一類是丁酰膽堿酯酶(BchE,EC 3.1.1.8,又稱血清膽堿酯酶,假性膽堿酯酶,非特異性膽堿酯酶),負責水解分子量較大的芳基或烷基膽堿酯,如丁酰膽堿和苯甲酰膽堿。
分布與生理功能
乙酰膽堿酯酶由神經(jīng)細胞和骨髓新生紅細胞合成,主要分布于腦灰質(zhì)、神經(jīng)節(jié)內(nèi)的神經(jīng)細胞和神經(jīng)肌肉接頭等神經(jīng)組織中,在紅細胞、血清等非神經(jīng)組織中也有分布。乙酰膽堿酯酶的主要生理功能是高效水解神經(jīng)末梢釋放的乙酰膽堿,保證神經(jīng)沖動在突觸間的正常傳導(dǎo)。
丁酰膽堿酯酶由肝臟粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成,廣泛分布于血清中,在肝臟、肺臟、脾臟等組織中也有分布。丁酰膽堿酯酶半衰期約為10d,較白蛋白半衰期21d短,可靈敏反映肝細胞蛋白質(zhì)合成能力的變化,因此其活性是臨床診斷肝病的重要生物指標之一。丁酰膽堿酯酶的異常過表達與阿爾茨海默病高度相關(guān),該病患者血清中丁酰膽堿酯酶活性明顯高于正常水平,而丁酰膽堿酯酶抑制劑可有效緩解患者癥狀。丁酰膽堿酯酶能夠與有機磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥結(jié)合,清除其對生物體的毒害作用。
檢測原理
乙酰膽堿酯酶水解膽堿酯類的速度為:乙酰膽堿>丙酰膽堿>丁酰膽堿,有研究表明,使用乙酰膽堿作為底物測得的乙酰膽堿酯酶活性是使用丁酰膽堿作為底物測得活性的30~100倍。因此,可使用乙酰膽堿作為底物檢測乙酰膽堿酯酶活性,使用丁酰膽堿作為底物檢測丁酰膽堿酯酶活性。
乙酰膽堿酯酶催化乙酰膽堿水解生成膽堿,丁酰膽堿酯酶催化丁酰膽堿水解生成膽堿,膽堿與二硫?qū)ο趸郊姿幔―TNB)作用生成5-巰基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm處有吸收峰,通過測定412nm吸光度增加速率,計算兩種酶的活性。
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溫馨提示
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