離子對(duì)試劑是由強(qiáng)親水離子形成,反作用于樣品分子的中性離子對(duì)。當(dāng)添加在流動(dòng)相中的離子對(duì)試劑進(jìn)入色譜柱后,一側(cè)的烷基鏈吸附在固定相上,另一側(cè)的可離子化終端吸附帶電荷的目標(biāo)化合物,從而提高色譜柱對(duì)樣品的保留能力。
盡管可能會(huì)對(duì)色譜柱造成傷害,但是離子對(duì)試劑也有著顯而易見的優(yōu)勢(shì):
◆ 可以顯著縮短分離時(shí)間,獲得更好的分離效果;
◆ 緩沖液制備簡(jiǎn)單;
◆ 碳鏈長(zhǎng)度選擇眾多,可達(dá)到增加保留時(shí)間、改善分離性質(zhì)的效果;
◆ 可有效改善峰型。
離子對(duì)試劑的種類和濃度的選擇依賴于所需樣品的理化性質(zhì)。若樣品是酸性化合物,一般選用四丁基溴化銨(SIT3060)、十二烷基san甲基氯化銨(SID3010)等離子對(duì)試劑;若樣品是堿性化合物,可以選擇戊烷磺酸鈉(SIS1100)、己烷磺酸鈉(SIS1110)、庚烷磺酸鈉(SIS1060)等離子對(duì)試劑;對(duì)于溶質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相差較大的混合樣品,離子對(duì)試劑種類的選擇則沒有特殊要求。同時(shí),在選用離子對(duì)試劑時(shí),一般盡可能優(yōu)先選用碳鏈短的離子對(duì)試劑,濃度盡量的低,這樣可以有效避免離子對(duì)試劑強(qiáng)保留對(duì)色譜柱產(chǎn)生的不可逆影響。
使用離子對(duì)試劑的時(shí)候還需注意什么?
選用離子對(duì)色譜分析法固然好處多多,但它的門檻也不低,一些重要的因素需要格外重視,否則將會(huì)影響檢測(cè)的峰型結(jié)果乃至儀器、色譜柱的長(zhǎng)期使用。
◆盡量專柱專用。大半部分離子對(duì)試劑以鹽為主,進(jìn)入色譜柱的離子對(duì)試劑很難清洗干凈。使用過離子對(duì)試劑的色譜柱換到其他流動(dòng)相使用后重現(xiàn)型較差。一般用過使用離子對(duì)試劑的色譜柱都是專用,不建議和其他流動(dòng)相混用;
◆注意體系重現(xiàn)性。離子對(duì)試劑本身沒有緩沖能力,對(duì)pH敏感,系統(tǒng)中殘留的酸和堿都會(huì)對(duì)體系造成影響;
◆需要長(zhǎng)時(shí)間平衡。離子對(duì)試劑在流動(dòng)相和色譜柱之間的平衡時(shí)間較長(zhǎng),使用之前需要對(duì)色譜柱長(zhǎng)時(shí)間平衡,梯度方法的平衡要求比較高;
◆精準(zhǔn)控制用量。在加入離子對(duì)試劑時(shí),在保證效果的同時(shí)加入量要盡量的少。這是因?yàn)樵谝欢ǚ秶鷥?nèi),離子對(duì)試劑的加入量跟目標(biāo)樣品的保留正相關(guān),由于跟固定相存在作用,所以一旦超過濃度,不僅不會(huì)增加目標(biāo)物的保留,反而會(huì)減少。一般長(zhǎng)鏈離子對(duì)試劑加入濃度在0.5mmol/L左右,短鏈離子對(duì)試劑加入濃度在5mmol/L左右,可以根據(jù)情況適當(dāng)增加。
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Solarbio離子對(duì)試劑的優(yōu)勢(shì):◆ 純度高:所有產(chǎn)品均具有較高純度;
◆ 適用范圍廣:針對(duì)HPLC、LC/MS,均能提供對(duì)應(yīng)的用于酸性樣品和堿性樣品分析的產(chǎn)品;
◆ 產(chǎn)品種類豐富:滿足色譜分析中絕大多數(shù)需要離子對(duì)試劑情況的需求。
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